OBSERVACIONES SOBRE EL USO DEL CULTIVO INTERCALADO DE GUAYABA (Psidium guajaba L.) EN EL CONTROL DEL HUANGLONBING DE LOS CITRICOS.

Eduardo A. Esquivel R.

Generalidades.

El Huanglongbing (HLB) o “Greening” de los cítricos, de origen bacterial, es considerada actualmente una de las enfermedades mas destructivas de los cítricos en el mundo. Su principal insecto vector en Asia y América es el psillido Diaphorina citri. La ausencia de medidas de control de la bacteria, y de variedades comerciales resistentes a la enfermedad, han llevado a considerar el control del vector como única alternativa para mantener las plantaciones sanas o con bajos niveles de afectación.

El método de control del Insecto mas efectivo es el químico, a través del uso de insecticidas o aceites minerales, con implicaciones ambientales serias. También se han considerado el uso de enemigos naturales como el himenóptero Tamarixia radiata. pero su efectividad es errática.

El “Factor Guayaba”.

Hace poco más de una década, los cultivadores de cítricos de Viet Nam, notaron que cuando cultivaban estos intercalados con Guayaba, la incidencia del vector y del HLB era nula o muy baja. (ACIAR, 2008). Esto fue investigado con mas detalle por el SOFRI (Southern Fruit Research Institute) de Viet Nam, confirmándose que esta practica de cultivo mantenía las plantaciones de cítricos libres de HLB, debido a que la guayaba tenia un efecto repelente hacia el Diaphorina citri. (FFTC, 2007).

En pocos años, científicos de los EEUU, Australia y Japón, visitaron Viet Nam para confirmar estos resultados, e iniciaron investigaciones con la guayaba en sus propios países. (PMN, 2007)(KARP,2008),(BEATTIE,et al. 2008).



En Florida, EEUU, el USDA importo el Banco de germoplasma de Psidium de Viet Nam e inicio una serie de ensayos de campo a gran escala con plantaciones de citrus intercaladas con guayaba. (STOVER,et al. 2008).

También se inicio una serie de investigaciones de laboratorio con la finalidad de identificar los componentes activos de los tejidos de la guayaba. Los resultados preliminares indican que los ingredientes activos en el control de los psilidos son varios sulfuros volátiles, principalmente: sulfito de hidrogeno, dióxido de azufre, Metametiol , Sulfuro de Dimetilo (DMS), Disulfuro de Dimetilo (DMDS), Metional y Trisulfuro de dimetilo (DMTS). ( ROUSEFF,et al. 2008).

De estos, se sabe que el DMDS, es toxico a los insectos, que forma parte de las defensas de la planta y es liberado solo cuando las hojas sufren daños mecánicos. Este compuesto no es producido por los cítricos. El DMDS se forma inmediatamente después que las hojas son lesionadas y permanece en el ambiente alrededor de la planta por cerca de 10 minutos. Adicionalmente se aislaron 47 compuestos volátiles de las hojas maceradas de la guayaba y el espacio alrededor de ellas. (ROUSEFF,et al. 2008).

El DMDS ( C2H6S2) es un producto conocido desde hace tiempo por los investigadores en este campo. Es producido también por otras plantas como defensa contra insectos. Su actividad insecticida es del tipo neurotoxica ya que interviene con los canales de calcio y potasio de la células nerviosas. (DUGRAVOTS, et al. 2003) (Carlini y Grossi-de-sa, 2002). Por sus propiedades insecticidas, fungicidas, nematicidas y herbicidas, este producto ha estado siendo estudiado como sustituto del Bromuro de Metilo (GAUTIER,et al., 2008). El producto llamado Paladin (Arkema) ha sido autorizado por la EPA (EEUU) para uso experimental como fumigante.

Algunos investigadores norteamericanos son de la opinión de que el cultivo intercalado de guayaba en los EEUU no es practico, ya que las densidades y variedades utilizadas en Viet Nam son diferentes, y que si se utiliza el DMDS solo como insecticida, no es necesario hacer cultivos intercalados de guayaba, y algunas investigaciones se orientan hacia esta posibilidad.

En Países más pequeños y con la citricultura menos desarrollada, como Panamá, este método podría ser efectivo ya que además la Guayaba es un frutal comercial promisorio.



Bibliografia

ACIAR. (2008). The ‘guava effect’: a new tool in the fight against citrus greening. In: Vietnam – Achievements. ACIAR/2007-2008 Report.
BEATTIE, A., et al. (2008) Retrospectives & Insights: Huanglonbing, Diaphorina citri, Citrus, Guava and Minerals Oils. ACIAR-University of Western Sydney. Australia.

Carlini CR and Grossi-de-sa MF. Plant toxic proteins with insecticidal properties. A review on their potentialities as bioinsecticides. Toxicon 40: 1515–1539, 2002.

DUGRAVOT S. ; GROLLEAU F. ; MACHEREL D. ; ROCHETAING A. ; HUE B. ; STANKIEWICZ M. ; HUIGNARD J. ; LAPIED B. (2003) Dimethyl disulfide exerts insecticidal neurotoxicity through mitochondrial dysfunction and activation of insect KATP channels. Journal of neurophysiology . 2003, vol. 90, no1, pp. 259-270.

Dugravot S, Sanon A, Thibout E, and Huignard J. Susceptibility of Callosobruchus maculatus (Coleoptera: Bruchidae) and its parasitoid Dinarmus basalis (Hymenoptera: Pteromalidae) to sulphur-containing compound: consequences on biological control. Environ Entomol 31: 550–557, 2002.

FFTC (2007). Evolution of Citrus Greening Pathogen (HLB) Strains in Aspac (Year 2). FFTC Pub. 2007-09-04.

Gautier, H. J. Auger, C. Legros, and B. Lapied .Calcium-Activated Potassium Channels in Insect Pacemaker Neurons as Unexpected Target Site for the Novel Fumigant Dimethyl Disulfide.J. Pharmacol. Exp. Ther., anuary 1, 2008; 324(1): 149 - 159.

KARP,D. (2008). Citrus industry pins hope on studies of a dire disease. New Yor Times. D1. 8/28/2008.

PMN. (2007). Suppressing Psyllids Could Curb Citrus Disease. USDA-ARS Publication. Plant Health Progress. Feb/2007.

Rouseff ,R. L. et al.. (2008). Sulfur Volatiles in Guava (Psidium guajava L.) Leaves: Possible Defense Mechanism. J. Agric. Food Chem., 2008, 56 (19), pp 8905–8910

STOVER,E. et al. (2008). Guava SSR Analysis: Diversity Assessment and Similarity to Accessions Associated with Reducing Citrus Greening in Vietnam. USDA-ARS.

OBSERVACIONES SOBRE EL HUANGLONBING DE LOS CITRICOS Y SU PATOGENO Candidatus Liberibacter spp.

Eduardo A. Esquivel R.

Generalidades.

La Enfermedad de los Citricos conocida como “Huanglonbing” (Retoños Amarillos) o “Greening”, fue reportada por primera vez en China a finales del siglo XVIII, y encontrada actualmente en casi toda Asia y gran parte del mundo. Su agente causal hasta hace menos de una decada era desconocido. Se atribuia su causa a problemas nutricionales, toxicidad, anomalias metabolicas y otras causas. Posteriormente se comprobo la trasmisión d ela enfermedad por injerto y por los insectos vectores.

En la segunda mitad del siglo XX, varios investigadores , por medio de observaciones microscopicas, encontraron una bacteria fastidiosa en el floema de las plantas afectadas. Sin embargo, esta bacteria no pudo ser aislada ni cultivada artificialmente con las tecnicas conocidas.

En 1994, Jagoeix, et al determinaron las caracteristicas del ADN de la bacteria, y propusieron que se trataba de un nuevo genero al que llamaron “Liberibacter”. Debido a que no se cumplieron con los postulados de Koch, la bacteria es llamada hasta ahora “Candidatus” Liberacter sp. o sea que se acepta como un nombre provisional.

Taxonomia del Patogeno.

Las dudas sobre la caracterizacion taxonomica del patogeno del HLB surgen debido a que la determinación segura del ADN de la bacteria por PCR, requiere de la purificación a cierto grado del patogeno y del material genetico del patogeno, metodología que no esta perfeccionada aun. Adicionalmente, varios investigadores han encontrado mas de un tipo de bacteria en el floema de los citricos afectados, lo que daria resultados confusos en este tipo de analisis.

De hecho, los investigadores han encontrado que la determinación del HLB a traves del PCR no es completamente segura, dando solo resultados confiables cercanos al 80%. Las experiencias en este sentido han demostrado que algunos arboles que inicialmente dieron HLB positivo a traves del PCR, posteriormente dieron resultados negativos con el mismo analisis, y viceversa. La unica forma de garantizar el resultado es la repeticion del analisis varias veces.

Es posible que los resultados erraticos del PCR se deriven del hecho que se trata de una bacteria dentro del tejido del huésped, que no puede ser cultivada, o sea, procesada en forma pura y aislada. La contaminación del ADN del huésped, o de otros microorganismos presentes en el floema, puede contribuir a la imprecision del metodo.

Las observaciones que muestran mas de una especie de bacteria en los tejidos infectados pueden dar indicios de que se trata de una enfermedad causada por dos o mas bacterias con relaciones de simbiosis nutricional. Esto tambien explicaria la imposibilidad de cultivar la bacteria en medios sinteticos o semi-sinteticos.





Caracteristica patologica del agente causante del HLB.

En este caso, el concepto de patogénesis no es aplicable en el sentido que se aplica a otros patogenos fungicos o bacteriales de las plantas, ya que la bacteria del HLB no se alimenta de tejido de la planta, ni su accion nutricional causa destrucción directa o necrosis de tejidos.

Al igual que otras “bacterias fastidiosas”, se trata de un microorganismo endofito que vive libremente en el sistema vascular y se nutre de la salvia de la planta. La reproducción y crecimiento masivo de la bacteria en los vasos del floema, ocasionan la obstrucción progresiva de la salvia, y por ende, del adecuado suministro de nutrientes a los diferentes organos de la planta. Esta obstrucción progresiva pude causar la muerte del hospedador. De esta forma, se le puede calificar de parasitoide, no de patogeno.

Los síntomas característicos del HLB son realmente síntomas de deficiencias nutricionales complejas, debido a la carencia de estos elementos en los órganos de la planta, debido a la obstrucción mecánica de los vasos y a la acumulacion toxica de almidones en los tejidos foliares.

Características biológicas del agente causante del HLB.

Al igual que otras bacterias fastidiosas como la Xylella , Clavibacter o Leifsonia, cuya taxonomita aun se discute, el organismo causal del HLB es una pequeña bacteria filamentosa crece en los vasos conductores, formando masas compactas que terminan obstruyendo los conductos.

También puede ser eliminado del tejido del hospedador a través del tratamiento térmico, como el Clavibacter xyli en la Caña de Azúcar... En este caso, de las Yemas para injerto.

Al igual que la Xylella y el Clavibacter, su aislamiento y cultivo artificial solo es cuestión de tiempo, ya que los medios para su cultivo son sumamente complejos y aun así su crecimiento es bastante lento.



Referencias.

Bastianel, C, M. Garnier-Semancik, J. Renaudin, J. M. Bove, and S. EveillardDiversity of "Candidatus Liberibacter asiaticus," Based on the omp Gene Sequence. Appl. Envir. Microbiol., November 1, 2005; 71(11): 6473 - 6478.

Jagoueix S., J. M. Bové, and M. Garnier. 1994. The phloem-limited bacterium of greening disease of citrus is a member of the α subdivision of the proteobacteria. International J. Systematic Bacteriology. 44:379–386 .

Jagoueix S., J. M. Bové, and M. Garnier. 1996. PCR detection of the ‘Candidatus’ Liberobacter species associated with greening disease of citrus. Molecular and Cellular Probes. 10:43–50.